Metode Penentuan Vitamin D

Pengukuran 25 Hydroxyvitamin D

Kebanyakan metode HPLC, tidak membedakan antara 25 (OH) D2 dan 25 (OH) D3 dalam serum, dan jumlah dari kedua komponen ada sebagai 25 (OH) D. Metode yang tersedia termasuk kompetitif pengikatan protein tes, radioimmunoassays, dan HPLC dengan deteksi selanjutnya langsung dengan  (UV) ultraviolet. dalam semua metode, pertama sterol harus diekstraksi dari serum dengan pelarut organik. pemulihan sterol hanya dapat digunakan untuk metode radioimmunoassay berdasarkan penggunaan pelacak tritium.
 Maka, hanya  metode HPLC mampu memisahkan dan mengukur 25 (OH) D2 dan 25 (OH) D3 (jones, 19.978, aksnes, 1992) dalam sampel serum tunggal (hummer, 1985), tetapi membutuhkan volume sampel yang besar, peralatan yang mahal, dan keahlian teknis yang cukup. Alat tes pengikat kompetitif menggunakan serum baik mamalia atau protein jaringan-yang mengikat 25 (OH) D. Koefisien variasi untuk dalam dan di antara tes adalah masing masing  4% -7% dan 7% -10%,  (van der Wielen, 1995)  cenderung lebih tinggi di kisaran yang lebih rendah dari pengukuran.

Radioimmunoassay (RIA) kit menggunakan baik   pelacak radioiodine, dan scintillation counter atau gamma, masing-masing. dari metode yang tersedia, RIA sekarang menggunakan metode pelacak radioiodin untuk mengukur serum 25(OH)D.

perawatan harus dilakukan, namun, untuk memastikan bahwa RIA kit terpilih mengukur baik beredar 25 (OH) D2 dan 25 (OH) D3 sama sehingga total 25 (OH) D dalam serum tidak diabaikan. Beberapa Kit membawa kedua 25 (OH) D dan 1,25 (OH) 2D.

Kinerja tes ali 25 (OH) D  harus dipantau melalui skema kualitas vitamin D penilaian eksternal. serum atau plasma sampel yang dikumpulkan menggunakan EDTA atau heparin sebagai suatu antikoagulan dapat digunakan untuk pengujian, dan sampel dapat dibekukan, meskipun pembekuan dan pencairan berulang harus dihindari.

Serum 1,25 (Oh) 2d

1,25 (OH) 2D (calcitriol) adalah bentuk aktif vit D. berinteraksi dengan reseptor nuklirnya dalam usus, tulang, dan ginjal untuk mengatur kalsium dan metabolisme tulang. 1,25 (OH) 2D juga memiliki beberapa tindakan noncalcemic seluler. untuk lebih lanjut rincian (seeholick) (2003).

Sintesis 1,25 (OH) 2D di ginjal dirangsang oleh konsentrasi serum rendah kalsium atau fosfor dan dihambat oleh kelebihan 1,25 (OH) 2D. Kecukupan vit. D dalam hubungan positif  antara serum 1,25 (OH) 2D dan 25 (OH) D konsentrasi, mungkin karena 25 (OH) D konsentrasi rendah  ada peningkatan konsentrasi hormon paratiroid, yang meningkatkan produksi  1,25 (OH) 2D di ginjal.

Metode analisis meliputi HPLC, tes pengikatan protein kompetitif , dan radioimmunoassay (RIA) menggunakan radionuklida atau pelacak tritium (pelacak radioiodin).

Alkalin Fosfatase Serum

 aktivitas alkali fosfatase  dalam serum dapat digunakan sebagai ukuran tidak langsung dari status vitamin D. Tetapi kegiatan peningkatan osteomalacia pada orang dewasa dan rakhitis  pada anak anak   umumnya osteoporosis normal dalam aktivitas alkaline fosfatase. Serum juga dipengaruhi oleh jenis kelamin dan usia, dan  perubahan arah dalam tingkat serum 25 (OH) D. Aktivitas alkali fosfatase serum secara signifikan lebih tinggi pada wanita dibandingkan dengan laki-laki dan pada orang dewasa yang lebih tua dibandingkan muda, kegiatan ini juga lebih tinggi pada anak-anak masa pertumbuhan dan wanita hamil, terutama selama trimester ketiga. aktivitas alkali fosfatase serum tersebut juga dipengaruhi oleh berbagai penyakit hiperparatiroidisme, kanker tulang sekunder, dan kolelitiasis.
pada umumnya, pengukuran aktivitas fosfatase alkali dalam serum paling baik digunakan untuk mengkonfirmasi diagnosis klinis defisinsi vitamin D.

Kalsium Dan Fosfor Dalam Serum Dan Urin

Banyak studi tentang status vitamin D telah memasukkan pengukuran kalsium dan fosfor konsentrasi dalam serum dan urin. pengukuran yang paling berguna jika dikombinasikan dengan pengukuran serum 25 (OH) D dan konsentrasi PTH. defisiensi vit D pada bayi dan anak-anak, kalsium serum dan kadar fosfor biasanya berkurang. misalnya, secara signifikan lebih rendah rata-rata konsentrasi kalsium serum dilaporkan pada neonatus Perancis dengan serum 25 (OH) D konsentrasi kecil dari 30nmol / L dan konsentrasi PTH meningkat, dibandingkan dengan subyek dengan nilai normal untuk parameter biokimia. seperti kalsium serum total saja, keberadaan seperti tiga serangkai gangguan biokimia sangat menunjukkan kekurangan vitamin D.